Lukasiewicz, K., Baker, J. J., Zuo, Y., & Lu, J. (2021). Serotonergic psychedelics in neural plasticity. Frontiers in molecular neuroscience, 221.
Introduction
Pour sonder l’enfer ou s’élever dans les airs, il suffit de prendre une pincée de psychédélisme.
Huxley and Osmond, 2018.
Le terme “psychédélique” a été inventé par le psychiatre Humphry Osmond en 1956 dans une correspondance avec le célèbre auteur Aldous Huxley pour désigner une classe de composés qui induisent de profonds changements dans la conscience. Combinant deux racines grecques, psyche (âme, esprit) et deloun (manifester), le mot signifie “manifestation de l’esprit”. Auparavant, ces composés étaient appelés “psychotomimétiques” en raison de leur capacité à induire un épisode transitoire semblable à la schizophrénie chez des personnes en bonne santé. Au fil des ans, les chercheurs ont désigné cette classe de composés sous les noms d’enthéogènes (“possédés par un dieu”), d’empathogènes (“générateurs d’empathie”), d’entactogènes (“toucher l’intérieur”) et d’hallucinogènes, reflétant ainsi une perspective en constante évolution sur leur impact physiologique et culturel.
Le terme le plus récent de “psychoplastogène” met l’accent sur ces drogues en tant que catalyseurs de la neuroplasticité dans le cerveau. Il existe de plus en plus de preuves que les psychédéliques favorisent la plasticité structurelle et fonctionnelle des synapses, des sites où les neurones se connectent et communiquent entre eux. Il est intéressant de noter que certains composés structurellement similaires partagent cette caractéristique mais n’ont pas d’effets hallucinogènes. Étant donné que l’on pense généralement que les changements dans les circuits synaptiques sous-tendent l’apprentissage et la mémoire et que de nombreux troubles psychiatriques présentent des déficits de neuroplasticité, les psychédéliques ont suscité un intérêt important de la part des chercheurs pour leurs mécanismes d’action moléculaires et cellulaires, ainsi qu’à leur potentiel thérapeutique pour les troubles psychiatriques tels que l’addiction, la dépression et l’anxiété.
Les psychédéliques classiques se répartissent en trois groupes principaux : les tryptamines, les ergolines et les phénéthylamines. Ils ont des origines diverses. Par exemple, la N, N-diméthyltryptamine (DMT) est naturellement présente dans le cerveau des mammifères ; la psilocybine est extraite des champignons Psilocybe et la mescaline du cactus peyotl Lophophora williamsii ; le diéthylamide de l’acide lysergique (LSD) et la 2,5-diméthoxy-4-iodoamphétamine (DOI) sont semi-synthétiques. Ils se lient préférentiellement au récepteur de la sérotonine 2A (5-HT2A), et l’affinité est fortement corrélée à l’effet hallucinogène. L’administration de kétansérine, un antagoniste du récepteur 5-HT2A, bloque l’effet hallucinogène de la psilocybine, un psychédélique classique. En outre, chez les souris 5-HT2A knock-out (KO), les psychédéliques ne produisent pas de réaction de contraction de la tête (rotation paroxystique de la tête à haute fréquence), une approximation du comportement hallucinatoire chez les rongeurs. Une étude humaine récente révèle également que l’intensité subjective de l’expérience psychédélique est corrélée à l’occupation des récepteurs 5-HT2A dans le cerveau. Par conséquent, la signalisation induite par l’activation des récepteurs 5-HT2A est probablement nécessaire pour que les psychédéliques provoquent des hallucinations, même si de nombreux psychédéliques se lient également à d’autres récepteurs (par exemple, 5-HT1A, autres récepteurs 5-HT2 et récepteurs de la dopamine). Étant donné que la sérotonine régule l’humeur, la réponse au stress, l’appétit et le traitement de la récompense, les composés ayant une affinité pour les récepteurs 5-HT peuvent affecter toutes ces fonctions cérébrales. Comme la pharmacologie et les voies de signalisation en aval des psychédéliques ont été couvertes récemment par d’excellentes revues, nous nous concentrerons plutôt sur le rôle des psychédéliques classiques dans la plasticité neuronale.
Les psychédéliques classiques et leurs effets sur la neuroplasticité et les circuits neuronaux
N, N-Diméthyltryptamine (DMT) et ses dérivés
La DMT est un ingrédient actif de l’ayahuasca (“vigne de l’âme” en langue quechua), une boisson hallucinogène consommée lors de rituels chamaniques en Amérique du Sud. Le DMT peut favoriser la neuroplasticité tant in vitro qu’in vivo. Dans des neurones corticaux de rats en culture, un traitement au DMT pendant 24 heures favorise la croissance des neurites (processus axonaux et dendritiques émanant du corps cellulaire neuronal), augmentant leur nombre, leur longueur et leur complexité. Le traitement augmente également la densité des épines dendritiques (minuscules protubérances des dendrites qui sont les sites postsynaptiques des synapses). L’augmentation de la spinogenèse est associée à la synaptogenèse, comme le montre l’augmentation de la densité des puncta de VGLUT1, un transporteur vésiculaire présynaptique de glutamate. De même, une seule dose élevée de DMT (10 mg/kg) augmente la densité synaptique sur les neurones pyramidaux du cortex préfrontal (PFC) de rats adultes. Les changements structurels s’accompagnent de changements fonctionnels, comme le montre l’augmentation de la fréquence et de l’amplitude des courants postsynaptiques excitateurs spontanés (EPSC) enregistrés ex vivo (Ly et al., 2018). En revanche, l’administration chronique et intermittente d’une faible dose de DMT (1 mg/kg) diminue la densité des épines dendritiques de la PFC chez les rats femelles, mais pas chez les rats mâles. Ces résultats suggèrent que l’effet psychoplastogène du DMT est dépendant de la dose et du sexe.
Les mécanismes moléculaires qui sous-tendent les effets neuroplastiques du DMT sont complexes. Ils impliquent probablement la signalisation 5-HT2A, car elle peut être bloquée par un co-traitement avec la kétansérine. Le co-traitement avec ANA-12, un antagoniste sélectif de TrkB (récepteur de tyrosine kinase B), ou la rapamycine, un inhibiteur de mTOR (cible mécaniste de la rapamycine), le bloque également, impliquant la signalisation TrkB et mTOR dans la neuroplasticité induite par le DMT également (Ly et al., 2018). En outre, le DMT est un agoniste du récepteur sigma-1, une protéine chaperonne du réticulum endoplasmique qui module la signalisation calcique. Comme les récepteurs sigma-1 peuvent réguler les canaux ioniques à potentiel et la transmission synaptique, ils peuvent constituer une autre voie par laquelle le DMT exerce des effets neuroplastiques.
La 5-méthoxy-N, N-diméthyltryptamine (5-MeO-DMT), un dérivé méthoxylé de la DMT, est présente de manière endogène dans plusieurs espèces de plantes, de champignons et dans le crapaud du désert de Sonoran, bufo alvarius. Il perturbe l’activité neuronale oscillatoire dans le PFC, le cortex visuel (V1) et le noyau médiodorsal du thalamus (MD) chez la souris. De manière surprenante, ces effets sont également observés chez les souris 5-HT2A KO, mais pas chez les souris 5-HT2A KO co-traitées avec WAY-100635, un antagoniste du 5-HT1A. On a émis l’hypothèse que l’action du 5-MeO-DMT pourrait dépendre de l’état du cerveau : chez les animaux anesthésiés, il cible préférentiellement les récepteurs 5-HT1A sur les interneurones inhibiteurs GABAergiques, tandis que chez les animaux éveillés, il se lie principalement aux récepteurs 5-HT1A sur les neurones pyramidaux excitateurs. De telles actions dépendantes de l’état affecteraient de manière différentielle l’équilibre excitation/inhibition dans le cerveau et pourraient expliquer l’effet opposé du 5-MeO-DMT sur les souris 5-HT2A KO anesthésiées par rapport aux souris éveillées. L’administration intracérébroventriculaire de 5-MeO-DMT augmente la prolifération des progéniteurs neuronaux et ces neurones nouveau-nés possèdent des tonnelles dendritiques plus complexes et présentent des potentiels d’afterhyperpolarisation plus courts ainsi que des seuils de potentiel d’action plus élevés par rapport aux témoins traités à la solution saline. En outre, une analyse par spectrométrie de masse d’organoïdes cérébraux humains traités au 5-MeO-DMT révèle ses effets modulateurs sur les protéines impliquées dans la potentialisation à long terme, la formation des épines dendritiques, la dynamique des microtubules et l’organisation du cytosquelette, soulignant l’impact potentiel du 5-MeO-DMT sur la neuroplasticité.
L’ibogaïne et ses analogues
L’ibogaïne est un dérivé psychoactif de la β-carboline isolé de l’écorce de la racine de l’arbuste de la forêt tropicale d’Afrique de l’Ouest Tabernanthe iboga. Elle présente une forte affinité pour plusieurs cibles, notamment les récepteurs N-méthyl-D-aspartate (NMDA), les récepteurs κ- et μ-opioïdes, et les récepteurs 5-HT2A. En outre, l’ibogaïne a la plus grande affinité pour le récepteur sigma-2 parmi les psychédéliques. Chez l’homme, l’ibogaïne est métabolisée par le cytochrome P450 2D6 (CYP2D6) en noribogaïne (10-hydroxyibogamine, également appelée 12-hydroxyibogamine dans la nomenclature du Chemical Abstracts Service). La noribogaïne présente des taux plasmatiques plus élevés et reste détectable pendant une période beaucoup plus longue que l’ibogaïne, ce qui suggère qu’elle pourrait être le composé actif in vivo. En effet, des recherches récentes ont suggéré que c’est peut-être la noribogaïne, plutôt que l’ibogaïne elle-même, qui stimule la neuroplasticité. Dans les neurones corticaux de rats en culture, la noribogaïne augmente la complexité de l’arborescence dendritique alors que l’ibogaïne ne le fait pas. Le co-traitement avec la kétansérine bloque cet effet de la noribogaïne, impliquant l’activation du récepteur 5-HT2A (Ly et al., 2018). Malheureusement, un dosage élevé d’ibogaïne (≥ 50 mg/kg) peut être neurotoxique : il induit une dégénérescence des cellules de Purkinje cérébelleuses chez le rat, peut-être en raison d’une excitotoxicité provenant de l’olive inférieure. La faible marge de sécurité entre la dose thérapeutique (40 mg/kg) et la dose neurotoxique soulève des inquiétudes quant à la sécurité de l’utilisation clinique de l’ibogaïne. Pour résoudre les problèmes d’hallucinogénicité et de toxicité de l’ibogaïne, les chercheurs ont effectué une synthèse orientée vers la fonction pour développer le tabernanthalog (TBG), un analogue non hallucinogène et non cardiotoxique de l’ibogaïne. Le TBG augmente la complexité des tiges dendritiques des neurones corticaux de rats en culture et accroît la formation des épines dendritiques dans le cortex somatosensoriel de souris in vivo. Ces effets peuvent être bloqués par un co-traitement à la kétansérine, ce qui indique l’implication de la signalisation du récepteur 5-HT2A. Une étude plus récente a montré qu’une dose unique de TBG peut remédier à l’anxiété élevée, à l’inflexibilité cognitive et aux déficits de traitement sensoriel chez des souris soumises à un stress léger imprévisible (UMS). Elle compense également en partie la perte d’épines dendritiques induite par l’UMS, restaure les propriétés électrophysiologiques des interneurones inhibiteurs exprimant la parvalbumine et normalise les activités neuronales corticales de base et sensorielles.
Psilocybine
La psilocybine est le principe actif des champignons dits magiques. Dans l’organisme, la psilocybine est rapidement déphosphorylée en psilocine, un composé qui se lie à plusieurs sous-types de récepteurs 5-HT avec une affinité relativement élevée. Les études in vitro et in vivo sur la psilocybine se sont concentrées sur ses effets sur les synapses excitatrices. Elles suggèrent que la psilocybine favorise la croissance et la force des synapses. Dans les neurones corticaux de rat en culture, la psilocine augmente la complexité de l’arborescence dendritique et la densité des épines dendritiques. De même, une dose unique de psilocybine favorise la formation d’épines dendritiques sur les neurones pyramidaux de la couche 5 dans le cortex frontal médian de la souris in vivo, augmentant de manière significative la densité des épines ; les nouvelles épines induites par la psilocybine ne sont pas moins stables que celles formées dans des conditions de contrôle. En outre, la psilocybine augmente la taille de la tête des épines, ce qui représente un renforcement des synapses. Dans l’hippocampe et le PFC de porcs, une dose unique de psilocybine favorise également la synaptogenèse, comme en témoigne l’augmentation persistante de la densité présynaptique de la protéine 2 des vésicules synaptiques (SV2A), une glycoprotéine intégrale présynaptique qui régule la libération des neurotransmetteurs. Une autre étude récente montre également que la psilocybine augmente la force synaptique, mesurée par l’augmentation du rapport AMPA/NMDA aux synapses entre les entrées temporoammoniques et les dendrites distales des neurones pyramidaux CA1 de l’hippocampe chez la souris.
LSD
Le LSD est une ergoline synthétisée pour la première fois par Albert Hofmann en 1938 à partir de l’acide lysergique présent dans l’ergot, un champignon qui pousse sur les céréales. Malgré l’intérêt de longue date pour les effets cognitifs du LSD, son impact cellulaire n’a été exploré que récemment. Au niveau des circuits neuronaux, le LSD peut moduler les tirs spontanés et les tirs en rafale des neurones GABAergiques du thalamus réticulaire et désinhiber les neurones relais thalamocorticaux dans le thalamus médiodorsal chez la souris, comme l’a montré l’électrophysiologie in vivo (Inserra et al., 2021b). Au niveau subcellulaire, une étude sur des neurones corticaux de rat en culture a révélé que le traitement au LSD pendant 24 heures augmente de manière significative la complexité des arborescences dendritiques et la densité des épines dendritiques. Il y a une augmentation simultanée de la densité synaptique, mesurée par la colocalisation du marqueur présynaptique VGLUT1 et du marqueur postsynaptique PSD95. Bien que le LSD se lie à plusieurs récepteurs 5-HT avec une grande affinité, ses effets neuroplastiques nécessitent l’activation du récepteur 5-HT2A, car ils sont abrogés par un co-traitement avec la kétansérine. Par la suite, il a été démontré que des périodes plus courtes (15 min-6 h) de stimulation au LSD suffisent déjà à augmenter la complexité des arborescences dendritiques et la densité des épines.
DOI
Les phénéthylamines sont probablement la classe de psychédéliques la plus explorée en raison de leur facilité de synthèse. Paradoxalement, nous savons relativement peu de choses sur les effets neuroplastiques de la plupart des phénéthylamines, à l’exception du DOI, qui a été synthétisé pour la première fois en 1973. Dans les neurones en culture, un traitement transitoire (1 h) au DOI augmente la taille des épines dendritiques, et un traitement plus long augmente la dynamique morphologique des cônes de croissance dendritiques ainsi que la complexité, la longueur et le nombre des neurites. Dans le cortex frontal de la souris, le traitement par la DOI augmente sélectivement la densité des épines courtes et fines, mais pas celle des épines en forme de champignon matures, sur les neurones pyramidaux de la couche 2/3 ; il améliore également la potentialisation à long terme (LTP) aux synapses de ces neurones. Des études in vivo montrent en outre que le DOI favorise la formation d’épines dendritiques dans le cortex sensoriel de la souris sans affecter l’élimination des épines.
Le DOI peut également perturber l’activité des cellules et des réseaux dans le cortex. Des enregistrements extracellulaires dans le cortex frontal du rat montrent que le DOI réduit les oscillations à basse fréquence et perturbe la relation temporelle entre les décharges des neurones pyramidaux et le potentiel de champ local (LFP). Ces deux effets peuvent être bloqués par l’antagoniste 5-HT2A M100907, ce qui implique une activation 5-HT2A. Dans le cortex visuel primaire de souris éveillées, la DOI réduit les réponses évoquées visuellement et la suppression de l’entourage, mais préserve l’organisation rétinotopique de base, les propriétés d’accord et la structure du champ réceptif, ce qui soutient l’idée que la réduction de l’entraînement sensoriel ascendant sous-tend les hallucinations induites par les psychédéliques.
Les effets de promotion de la neuritogenèse et de la synaptogenèse du DOI sont bloqués en culture lorsqu’ils sont traités conjointement avec l’ANA-12, la kétansérine ou la rapamycine, ce qui implique la signalisation de TrkB, 5-HT2A et mTOR, respectivement, dans les effets en aval du DOI. En outre, une administration unique de DOI à des souris knock-out 5-HT2A n’augmente pas la densité des nouvelles épines synaptiques dans le cortex frontal, ce qui suggère que l’activation de la 5-HT2A est essentielle pour la neuroplasticité induite par le DOI. Les effets du DOI dépendent également de la kalirine-7, un facteur d’échange de guanine nucléotide qui est un régulateur majeur de la morphogenèse des épines dendritiques dans les neurones pyramidaux, car l’incubation de neurones corticaux cultivés dans des peptides interférant avec la kalirine-7, des peptides qui déplacent la kalirine-7 de la densité postsynaptique des épines dendritiques, bloque également les effets neuroplastiques du DOI. Cependant, il existe des preuves qu’une seule administration de DOI à des souris induit des changements épigénétiques dans les régions d’enhancement, des régions de l’ADN qui augmentent la probabilité que certains gènes soient transcrits, qui persistent au moins une semaine après l’administration de DOI, suggérant une base moléculaire pour des effets à long terme.
Kétamine
Synthétisée pour la première fois en 1965, la kétamine n’est pas un psychédélique sérotonergique, mais un antagoniste non compétitif du récepteur N-méthyl-D-aspartate (NMDAR) initialement utilisé comme anesthésique général. La kétamine produit également des effets psychologiques importants, notamment des hallucinations et une dissociation de la réalité, ce qui n’est pas sans rappeler les effets comportementaux des psychédéliques. En outre, des études récentes ont mis en évidence son effet antidépresseur. Il est donc intéressant de discuter des effets de la kétamine avec ceux des psychédéliques.
Comme les psychédéliques classiques, la kétamine favorise également la neuroplasticité. Les neurones corticaux de rats cultivés augmentent de manière significative la spinogenèse et la synaptogenèse après 15 minutes de traitement à la kétamine. De même, un traitement transitoire à la kétamine favorise l’arborisation dendritique des neurones dopaminergiques cultivés à partir du mésencéphale embryonnaire de souris ou dérivés de cellules souches pluripotentes induites humaines (iPSC. Une amélioration de la plasticité structurelle est également rapportée par de multiples études animales. Par exemple, la kétamine augmente rapidement la densité des épines des neurones pyramidaux L5 dans le cortex préfrontal médian (mPFC) des rats (Li et al., 2010) ainsi que dans les neurones CA1 hippocampiques chez les rats Flinders Sensitive Line (FSL), un modèle génétique de la dépression ; il améliore également de manière significative la diminution de la densité des épines dans le mPFC et l’hippocampe de souris soumises à un stress chronique de défaite sociale. Des études d’imagerie in vivo montrent en outre que la kétamine améliore la formation des épines dans le cortex frontal médian de la souris et le cortex somatosensoriel, et restaure partiellement les épines perdues lors d’une exposition chronique à la corticostérone. Cette plasticité serait à l’origine de l’effet de sauvetage de la kétamine sur les comportements de type dépressif dans les modèles de rongeurs. En plus de la plasticité structurelle, la kétamine peut provoquer une forme de plasticité synaptique fonctionnelle rappelant l’augmentation synaptique homéostatique, fournissant un autre mécanisme cellulaire possible pour son effet antidépresseur.
Conclusion et discussion
Depuis le début du 20e siècle, l’utilisation des psychédéliques pour traiter les maladies mentales a suscité un intérêt considérable. De nombreuses études cliniques ont montré le potentiel thérapeutique encourageant des psychédéliques, en particulier du LSD et de la psilocybine, et dans une moindre mesure de l’ayahuasca, de l’ibogaïne et de la dipropyltryptamine (DPT), pour traiter des troubles tels que la dépendance à l’alcool, à la nicotine ou aux drogues illicites, l’anorexie mentale, la dépression, la détresse et l’anxiété liées à la mort, les troubles obsessionnels compulsifs et le syndrome de stress post-traumatique. Les effets neuroplastiques des psychédéliques n’ont toutefois été appréciés que beaucoup plus récemment. Étant donné que le DMT, le LSD et le DOI, représentants de trois classes de psychédéliques, ainsi que la kétamine, ont tous la capacité de promouvoir la ramification dendritique et la formation d’épines dendritiques, il est concevable que les effets thérapeutiques des psychédéliques soient au moins partiellement médiés par la reconfiguration des réseaux neuronaux. La formation de nouvelles épines dendritiques représente l’ajout de nouvelles synapses au circuit neuronal. Les nouvelles connexions synaptiques persisteront ou seront éliminées en fonction de l’activité ; leur présence ou leur disparition façonnera à son tour les schémas d’activité des neurones sur lesquels elles se trouvent. En outre, les psychédéliques peuvent moduler l’excitabilité dendritique de manière compartimentée par le biais d’interactions avec des sous-types de récepteurs 5-HT qui sont co-exprimés dans le même neurone mais avec des localisations subcellulaires distinctes. Le contrôle local de l’excitabilité membranaire affectera la signalisation calcique dendritique et, par conséquent, la plasticité synaptique et modifiera l’intégration synaptique. Grâce à ces modifications structurelles et fonctionnelles réciproques, certaines nouvelles synapses peuvent finir par supplanter les synapses aberrantes existantes et le circuit neuronal peut cesser les tirs anormaux qui sous-tendent les maladies mentales. La modification physique de la connectivité des circuits neuronaux pourrait expliquer la persistance des améliorations symptomatiques.
Les mécanismes d’action moléculaires des psychédéliques sont très complexes. Bien que la signalisation 5-HT2AR soit largement considérée comme un facteur majeur des effets des psychédéliques, certaines études récentes indiquent qu’elle n’est pas le seul acteur. Une étude montre que le traitement à la kétansérine n’abolit pas l’effet antidépresseur de la psilocybine chez la souris ; une autre suggère que la psilocybine diminue la densité des 5-HT2AR dans l’hippocampe et le PFC des porcs tout en augmentant la densité synaptique. En effet, en plus d’être des agonistes ou des agonistes partiels du 5-HT2AR, tous les psychédéliques connus sont également des agonistes du 5-HT2CR. Le 5-HT1AR est également probablement impliqué, en particulier pour les tryptamines et le LSD. En outre, les psychédéliques peuvent avoir une affinité pour d’autres récepteurs. Par exemple, le LSD est un agoniste à haute affinité pour les récepteurs dopaminergiques (Watts et al., 1995). En fait, un criblage de 35 psychédéliques sur 51 récepteurs, transporteurs et canaux ioniques suggère que le profil d’interaction des psychédéliques est plus large que ce que l’on croit généralement. Au niveau intracellulaire, des preuves de plus en plus nombreuses suggèrent un rôle central des voies de signalisation TrkB/BDNF (facteur neurotrophique dérivé du cerveau) et mTOR dans les effets neuroplastiques et comportementaux des psychédéliques. Il est intéressant de noter que, bien que la kétamine se lie à un récepteur complètement différent (NMDAR), ses effets pro-synaptogenèse et antidépresseurs engagent également la signalisation BDNF et mTOR. Une telle convergence dans la signalisation intracellulaire fournit non seulement un mécanisme moléculaire pour les phénotypes cellulaires et comportementaux partagés de la kétamine et du traitement psychédélique, mais laisse également entrevoir l’étiologie moléculaire des anomalies psychiatriques qu’ils améliorent tous deux. Parallèlement, de futures études sur les voies de signalisation distinctes engagées par ces médicaments aideront à résoudre les différences de durée d’effet et d’autres caractéristiques pharmacologiques.
De nombreuses questions concernant les effets neuroplastiques des psychédéliques restent à résoudre. La dynamique des épines dendritiques est-elle localisée à certains points chauds de la dendrite, spécifique à des entrées particulières, ou uniformément distribuée à travers l’arborescence dendritique ? Quelles sont les implications fonctionnelles de la plasticité structurelle observée ? Par exemple, les nouvelles synapses induites sont-elles plus fortes et plus actives ? Les différents types de psychédéliques, avec leur pharmacologie complexe, induisent-ils une neuroplasticité avec des schémas spatio-temporels différents dans des types de neurones spécifiques ? En outre, il est important de clarifier les fondements moléculaires et circulatoires des effets différentiels générés par les psychédéliques et leurs analogues. Enfin, comment les effets hallucinogènes et neuroplastiques interagissent-ils et contribuent-ils au potentiel thérapeutique des psychédéliques ? Pour répondre à ces questions, une collaboration interdisciplinaire est nécessaire entre les chimistes, les biologistes moléculaires/cellulaires, les physiologistes synaptiques et les neuroscientifiques cliniques.
